miniaturadaimagem|Um modelo representando a divisão do Santuário, em primeiro plano o Lugar Santo e ao fundo o Santo dos Santos Santo dos Santos ou Santíssimo Lugar (em hebraico, קֹדֶשׁ הַקֳּדָשִׁים Transl. Qoḏeš haq-Qŏḏāšim) ou Devir (em hebraico הַדְּבִיר) had-Dəḇir 'o Santuário') era uma sala do Tabernáculo, e mais tarde, se transformou em uma sala do Templo de Salomão de 10 cúbitos x 10 cúbitos (5 m x 5 m)http://www.jesusnet.org.br/tabernaculo/sdsantos.htm onde ficava guardada a Arca da Aliança.
Na Bíblia Hebraica refere-se ao santuário interior do Tabernáculo, onde a Xequiná (presença de Deus) aparecia. De acordo com a tradição hebraica, a área era definida por quatro pilares que sustentavam o véu da cobertura, sob o qual a Arca da Aliança era mantida acima do solo. De acordo com a Bíblia Hebraica, a Arca continha os Dez Mandamentos, que foram dados por Deus a Moisés no Monte Sinai. O primeiro Templo de Jerusalém, chamado Templo de Salomão, terá sido construído pelo Rei Salomão para guardar a Arca.
As tradições judaicas viam o Santo dos Santos como a junção espiritual dos Sete Céus e da Terra, o "axis mundi".
Como parte do Templo de Jerusalém, o Santo dos Santos estava situado algures no Monte do Templo; a sua localização precisa é alvo de disputa, com algumas fontes judaicas clássicas a identificarem a sua localização com a Pedra da Fundação, que se encontra sob a atual Cúpula da Rocha. Outros estudiosos judeus argumentam que relatos contemporâneos colocariam o Templo a norte ou a leste da Cúpula da Rocha.
Os Cruzados associavam o Santo dos Santos ao Poço das Almas, uma pequena caverna que fica por baixo da Pedra da Fundação na Cúpula da Rocha.
Era aqui que se realizava anualmente uma cerimônia de sacrifício expiatório de um cordeiro sem mácula (Ex. 12:5) pelos pecados do povo (Lev 4:35). Esta sala ficava separada do templo por uma cortina de linho. Em caso de estar em pecado ao entrar, o sacerdote morria. E como o lugar era santíssimo, outros não poderiam entrar, somente ele.
Arão, o irmão de Moisés, foi o primeiro sumo sacerdote de Israel. Ele foi sucedido pelo seu filho mais velho (sobrevivente), Eleazar. O sumo sacerdote (Heb. hakohen, "o sacerdote", hakohen hagadol, "o grande Sacerdote") tinha a posição mais alta na hierarquia Israelita. O sumo sacerdote foi ungido assim como um rei na sua coroação. Ele usava vestes especiais, tinha uma coroa, e um peitoral que continha o urim e o tumim. Ele entrava no Santo dos Santos para fazer expiação pelos pecados da sua própria casa como também pelos pecados da nação. Para adentrar ao lugar santíssimo havia também a cerimônia do incenso, onde o sumo sacerdote tinha todo um ritual a cumprir para só então poder entrar ao Santo dos Santos.
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