thumb|200px|Reticulocitos teñido para distinguirlos de glóbulos rojos maduros. Los reticulocitos son glóbulos rojos que no han alcanzado su total madurez. Se encuentran en niveles elevados en el plasma sanguíneo por causa de algunas anemias, cuando el organismo incrementa la producción de glóbulos rojos y los envía al torrente sanguíneo antes de que sean maduros.BECKER K., Ana. Interpretación del hemograma (en español). Rev. chil. pediatr. [online]. 2001, vol.72, n.5 [citado 2010-01-18], pp. 460-465. ISSN 0370-4106. doi: 10.4067/S0370-41062001000500012. Los reticulocitos se caracterizan por presentar una red de filamentos y gránulos que hacen que se tiñen en el frotis de sangre, distinguiéndose así de los glóbulos rojos maduros. Normalmente representan el 0,5-1,5% del conteo de glóbulos rojos, pero pueden exceder el 4% cuando compensan la anemia.
Morfología Parámetros seleccionados de la construcción de reticulocitose indicadores identificados para que estas célulaspara la comparación los datos correspondientes de los eritrocitosCaracterísticaReticulocitos Eritrocitosdiámetro (μm)9±1>7,5±0,3volumen (fl)112,5±17,5>90±10masa de hemoglobina (pg)29,5±2,5=29,5±2,5hemoglobina (g/dl)29±3<35±2,5
Los reticulocitos son células anucleadas predecesoras de los eritrocitos con la diferencia de que poseen gránulos de ribosomas y algunas mitocondrias que les son útiles para sintetizar el 35 % de la hemoglobina restante. Este tipo de células está en la circulación periférica aproximadamente un día para convertirse posteriormente en un hematíe maduro que cumplirá con todas las funciones biológicas de estas células. A diferencia de los hematíes o glóbulos rojos maduros, los reticulocitos aún poseen ARN.
El reticulocito es la célula roja que antecede en maduración al eritrocito, es el resultado de la pérdida del núcleo que sufre el eritroblasto ortocromático. Su tamaño varía de 10 - 15 micras de diámetro.
Maduración thumb|eritrocito (izquierda) y reticulocito (derecha) El reticulocito tiene una vida media de dos días en médula ósea, de allí sale a la circulación donde requiere un día para convertirse en célula roja madura. Durante este período sintetiza el 20% de la hemoglobina contenida en la célula roja. Se han propuesto varios mecanismos mediante los cuales el reticulocito finaliza su maduración: autofagia y eyección de orgánulos no necesarias, acción "pitting" del bazo y degradación bioquímica por medio de la 5 pirimidín nucleotidasa.
Patología del reticulocito El reticulocito puede mostrar alteraciones en el tamaño y/o presentar cuerpos de inclusión (punteado basófilo, cuerpos de Howell Jolly). La génesis del aumento de tamaño, involucra una respuesta normal de la médula ósea a un estímulo intenso de la eritopoyetina. Dependiendo del grado de estimulación se pueden presentar los siguientes eventos:
Incremento del número de reticulocitos en sangre periférica, normales y aumentados de tamaño, a expensas del pool medular. Esto implica una disminución de la permanencia de estas células en médula ósea.
Presentación en circulación de reticulocitos que pueden alcanzar dos veces el tamaño normal, como resultado de la expulsión del núcleo del eritroblasto policromatófilo, saltándose el estadio de eritroblasto ortocromático.
Ambas situaciones, se asocian con reticulocitos inmaduros en sangre periférica, denominados por los autores macro-reticulocitos de "estrés", reticulocitos medulares, reticulocitos prematuros. Este último término fue el acogido por los integrantes de la reunión (Departamento de Hematología, Servicio de Hematología Infantil, Servicio de Hematología de Adultos) para referirse a estas células.
Utilidad e interpretación La determinación de los reticulocitos permite evaluar la producción eficaz de células rojas por la médula ósea. Su utilidad real es conocer la capacidad de respuesta de la médula en aquellos casos en los cuales hay disminución de las células rojas en sangre periférica y es necesario que la médula aumente su producción para así compensar el déficit de dichas células. Esta información es de fundamental importancia en el diagnóstico de anemias por falla en la producción (anemia aplásica) y por aumento en la destrucción (anemia hemolítica).
La actividad eritropoyética efectiva, de la médula ósea, es proporcional al número de reticulocitos en sangre periférica, este valor representa el grado de producción y liberación de eritrocitos por la médula ósea a circulación. Así, los recuentos reticulocitarios superiores a los valores establecidos como normales, indican aumento en la eritropoyésis, situación que se presenta como respuesta a hemorragias (aguda o pérdida de sangre), anemias hemolíticas y durante el tratamiento de anemias nutricionales (anemia ferropénica y anemia megaloblástica).
Los recuentos bajos de reticulocitos, sugieren una eritropoyésis defectuosa como en los casos de anemia aplásica, crisis aplásica de anemias hemolíticas y en la infiltración de la médula ósea por células tumorales. Por lo tanto la evaluación de los reticulocitos constituye una herramienta fundamental en el diagnóstico de las anemias y de algunas entidades cuya génesis involucra la producción eritroide en la médula ósea.
Razones de las desviaciones del porcentaje normal de reticulocitos en sangre periféricaReticulopeniaporcentaje bajo de reticulocitos (<20 000/μl)Reticulocitosisporcentaje elevado de reticulocitos (>100 000/μl)Fisiológicos Recién nacidos presión de oxígeno bajo en el ambienteLa presión de oxígeno del ambiente no debe confundirse con el contenido de oxígeno en el aire, que varía según la misma curva (por ejemplo, 50% de la presión de oxígeno a nivel del mar en comparación con los 4800 metros sobre el nivel del mar). En otras palabras, si el contenido de oxígeno es de 21% a nivel del mar, a una altitud de 4800 m sobre el nivel del mar también es del 21%, pero con menos presión - de modo que su presión parcial será sólo 0,105 atm. Cabe recordar que el límite de desmayo es de unos 0,16 atm (16% de oxígeno a presión normal). en las personas que viven por encima de 1900 m sobre el nivel del mar durante un largo períodoPatológicos Daños a la médula ósea Aplasia congénita de la médula roja Toxicidad u otros daños al hueso Deficiencia de vitaminas y oligoelementos deficiencia Vitamina B9 (ácido fólico) deficiencia de vitamina B12 Anemia perniciosa deficiencia de hierroGONZALEZ GARCIA, M. E.; CEPEDA PIORNO, J.; GONZALEZ HUERTA, A. J. y FERNANDEZ ALVAREZ, C.. Infradiagnóstico del déficit de hierro en pacientes ambulatorios debido al mal uso y a las limitaciones de los marcadores bioquímicos: utilidad del contenido de hemoglobina del reticulocito (en español). An. Med. Interna (Madrid) [online]. 2008, vol.25, n.2 [citado 2010-01-19], pp. 98-99. ISSN 0212-7199. tratamiento con citostáticos tratamiento de cáncer tratamiento de ciertas patologías del colágeno deficiencia de eritropoyetina insuficiencia renal caquexia infeccines devastadoras, incluyendo sida algunas enfermedades crónicas anemia aplásica e hipoplástica anemia de Diamond-Blackfan hemólisis influencia de toxinas bacterianas, virus, parásitos de la sangre (malaria, por ejemplo) razones inmunológicas razones mecánicas - en su mayoría de las válvulas artificiales de corazón talasemia, esferocitosis congénita y otras anemia hemolítica congénita policitemia hemorragias ciertos tipos de cáncer en pacientes con tumores productores de eritropoyetina pacientes con metástasis óseas iatrogenia medicamentos hematopoyéticos esplenectomía tratamiento con hierro, ácido fólico, vitamina B12,
Cuando la respuesta medular en cuanto a producción de células rojas está incrementada, las células policromatófilas detectadas en sangre periférica, dificultan la evaluación de la macrocitosis, puesto que son células con aumento de tamaño dada su inmadurez; por lo tanto al realizar esta cuantificación se debe tener cuidado de no falsear el valor de la macrocitosis a expensas de la policromatofilia estimando una macrocitosis mayor a la real. Es de anotar que en estos casos, el promedio de volumen corpuscular (PVC) se encontrará por encima del valor establecido como normal, también falsamente incrementado por el número de reticulocitos.
Evaluación en sangre periférica + Procedimiento para la prueba de reticulocitos Materiales Sangre total con anticoagulante EDTA.Tubos de ensayo.Goteros.Azul de cresil brillante.Baño María 37.ºLáminas.Aceite de inmersión. ProcedimientoColocar en un tubo de ensayo 2 gotas de sangre previamente mezclada.Agregar 2 gotas de colorante filtrado.Mezclar suavemente.Incubar por 10 - 15 minutos en el baño María a 37º. Al finalizar los 15 minutos mezclar bien el contenido del tubo.Realizar extendidos en lámina y dejas secar a temperatura ambiente.Colocar el extendido sobre la platina del microscopio y enfocar en bajo poder (10X) para localizar el área donde los glóbulos rojos no estén superpuestos.Pasar al objetivo de 100X cuidadosamente y agregar una gota de aceite de inmersión.Iniciar el conteo. Las células rojas toman una coloración grisácea verdosa. El RNA presente en los reticulocitos se colorea de azul intenso.Contar todas las células rojas presentes en el campo seleccionado y luego enumere los reticulocitos existentes, localizar un segundo campo y continuar hasta que todos los reticulocitos existentes en 1000 células rojas hayan sido contadas. ObservacionesEl recuento se puede realizar en sangre capilar.Los extendidos se pueden realizar en laminilla.El azul de cresil brillante debe filtrarse antes de usarse.Se recomienda repetir el conteo cuando se obtienen valores por encima del 3%.IPR > 3, indica aumento de actividad eritropoyética medular (anemia regenerativa)IPR < 2, indica escasa actividad eritropoyética.Nota:IPR = % reticulocitos corregido
La eritropoyésis efectiva se determina por el recuento de reticulocitos en sangre periférica, el cual se expresa en valor relativo o porcentual (número de reticulocitos por 100 células rojas) y en valor absoluto (total de reticulocitos circulantes por cada milímetro cúbico (mm³) de sangre). El conteo de reticulocitos se puede dar por tinción con un colorante especial para reticulocitos (Azul de cresil brillante) de naturaleza basofila y por el cual las mitocondrias y ribosomas tendrán afinidad y los mostrara en el frotis de un color azul moteado.
Valores de referencia (Valor relativo): Hombres 0.6 – 2.6 % Mujeres 0.4 – 2.4 % Recién nacidos 2.5 – 6.5 % (desciende nivel adultos a la segunda semana)
(Valor absoluto) 40 – 100 x 109/L promedio 60 x 109/L
Cuando se altera la duración del estadio reticulocitario en médula ósea, específicamente en las anemias severas, se emplean otras formas para evaluar la producción de células rojas viables como se expresa a continuación.
Cuando tenemos muchos reticulocitos libres en la sangre es señal de haber sufrido algún tipo de estrés o hipoxia porque estimulamos la producción de eritropoyetina, esta proteína induce a la producción de los precursores del hematíe, y por lo tanto de reticulócitos.
En microscopía electrónica es fácil de reconocer por su superficie irregular, con invaginaciones y presencia de múltiples orgánulos como: mitocondrias, pequeño número de ribosomas, remanentes del aparato de Golgi y protoporfirina. Al microscopio de luz se identifica mediante coloraciones supravitales (azul de cresil brillante, nuevo azul de metileno). El colorante se absorbe y el ARN y los demás orgánulos citoplasmáticas se precipitan como sustancia reticulofilamentosa, visible en los extendidos secos, como gránulos amorfos intracelulares que se tiñen de azul profundo.
Coloreado con Wright o Gimsa, el reticulocito se identifica por su basofilia difusa llamada policromatofília y por ser una célula ligeramente más grande que el eritrocito. La célula debe poseer al menos dos gránulos de precipitado bien definidos y separados de la membrana para considerarla reticulocito.